猪细小病毒病诊断与及预防

    猪细小病毒病概述猪细小病毒病也称猪繁殖障碍病，主要危害繁殖母猪，病原体为猪细小病毒，目前该病在本地广为流行，其病症特征主要表现在妊娠母猪特别是初产母猪，当母猪妊娠受到感染后，会引起流产、产死胎、胚胎死亡、木乃伊化胎儿和产弱仔、母猪发情不正常、久配不孕等临床症状。一般妊娠猪在怀孕前期感染多出现木乃伊化胎儿；怀孕7周后感染多出现产死胎；怀孕10周后感染多出现流产；怀孕后期感染的母猪多正常产仔，但这些仔猪带毒或带有抗体。猪细小病毒病一般呈地方性流行或散发，多发生于春、夏或母猪产仔和交配的一段时间。肉眼可见病变，母猪子宫内膜有炎症，胎盘有融化现象，胎儿在子宫内有被溶解、吸收等现象等。对于未感染过该病的猪场，应杜绝引进带毒猪；发病猪场对初产母猪在配种前5-6周应进行疫苗接种；配种前3-4周再进行第二次免疫接种。

    流行特点几乎所有猪群都感染此病，不同品种、性别、年龄的猪都易感，后备母猪比经产母猪易感染，传染源是带毒的公猪和母猪，流产和死胎、活胎及子宫分泌物中含有大量病毒，而带毒猪所产的活猪可能带毒排毒时间很长甚至终生。

    临床症状猪群暴发此病时常与木乃伊、窝仔数减少、母猪难产和重复配种等临床表现有关。在怀孕早期30-50天感染，胚胎死亡或被吸收，使母猪不孕和不规则地反复发情。

    怀孕中期50-60天感染，胎儿死亡之后，形成木乃伊，怀孕后期60-70天以上的胎儿有自免疫能力，能够抵抗病毒感染，则大多数胎儿能存活下来，但可长期带毒。

    防治严格执行卫生防疫制度，在污染的猪场用疫苗接种或采取自然感染结合，推迟初配日龄的方法。

    猪细小病毒病诊断自1967年Cartwright等首次报道PPV病以来，有关该病诊断方法的研究报告较多，从最初的病毒分离鉴定，到血凝及血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验等免疫学方法，直到核酸探针、聚合酶链式反应等分子生物学技术应用到PPV病的诊断中。

    病毒分离和鉴定用于诊断PPV感染的最大优点是结果准确可靠，可以作为最后确诊。用于分离PPV的病料，一般为流产或死产胎儿的脑、肾、肝、肺、睾丸、胎盘及肠系膜淋巴结等，其中以肠系膜淋巴结和肝脏的分离率最高。虽然此方法是最准确的诊断方法，但是其费时费力，并且需要一定的技术条件和设备，另外，其感染力会随着胎儿死亡时间而降低从而限制了临床应用；红细胞凝集试验(HA)操作简便易行，且能进行快速、大量的诊断，但是其灵敏度低、特异性不强，只能作为辅助诊断方法。

    血凝抑制(HI)试验是检测PPV抗体最常用的经典方法，一般采用试管法和微量法。利用HI试验检测人工感染PPV的猪，发现感染后5天即可检测到相应抗体，12~14天抗体滴度高达1024~4096，并能持续多年检出抗体。待检血清进行HI试验时需要首先进行热灭活处理，然后再用红细胞吸附，以除去血清中的非特异性血凝素，进一步用高岭土吸附以除去或减少血清中非特异性抑制因子。目前，该方法在国内外已得到广泛应用。血清中和试验(SN)也是检测PPV抗体的方法之一，其原理是利用被检血清的抗体中和PPV，然后根据培养细胞的病变情况来计算血清抗体的滴度。SN的特异性比HI高，但是SN的操作较为复杂，首先要进行病毒感染力的测定，而PPV在低剂量时并不引起细胞病变，从而限制了该方法的使用。1988年，Hohdatsu等率先建立了PPV的ELISA诊断方法并用于检测PPV的血清抗体，我国姜永厚等(1997)建立了双抗体夹心ELISA用于检测PPV的抗原，可建立的ELISA诊断方法非特异性较强。邵振华、田海燕(中国兽药监察所)用滤纸采集猪血样，加入到预先用PPV抗原处理的微孔板小孔内，进行免疫间接过氧化物酶染色试验检测PPV抗体，在2-3小时内即可观察结果。对比试验证实比HI敏感(高7.4%)，特异性更强。就操作过程而言，该方法比HI要简单，且具有采血方式新颖、送样方便以及抗原软板可随意剪取、不需要特殊的仪器设备等优点，但该方法中抗原的保存时间有限，因此限制了该方法的普及应用。