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组织培养技术在百合研究生产中的应用--培养基和培养结果

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一般用琼脂固体培养基,常用配方是MS十蔗糖或白糖30克/升,按需加入各种植物激素。

(1)无菌种子播种 用1/2MS,不加任何激素。种子可萌发为无菌实生苗。

(2)鳞片、叶片培养 用MS十BA 0.1一1.0十NAA 0.1—1.0毫克/升。对于不同种或品种的百合,激素含量与种类不同,以后鳞片或叶片都可产生小鳞茎状突起而分化成苗(表5)。在高NAA低BA的培养基上,可1次形成完整植株。但幼苗根部有肿胀现象。相反,高BA低NAA时,能形成大量小鳞茎状突起,从中分化出芽而无根。这样的苗子可转入生根培养基上(MS十IAA l十BA 0.2,或MS十NAA 0.8—10毫克/升十BA 0.2毫克/升,培养基PH为5.8。或用NAA、IBA代替IAA).使其壮苗生根。杜永芳等采用ABT生根粉替代NAA和IBA,对百合组培苗有良好的发根效果,最适浓度为0.3毫克/升。将生根的植株直接移入营养钵中易于成活。

(3)茎段、花柱和珠芽的培养 用Ms十IAA l十BA 0.2毫克/升.可以直接分化出芽。在花器官中以花丝为材料,优于花柱和子房。麝香百合花器培养的植株,生长约6个月以后,即可开花。

(4)根的培养 以毛百合根为材料,在MS十NAA 0.5—1.0毫克/升的培养基上,形成肿胀的粗根,将其切成小段,转到MS十BA 2十NAA 0.2的培养基上培养,便能分化出苗。而轮叶百合在上述培养基上本形成肿胀的根段。

毛百合试管苗经5—6个月后,能形成直径17毫米左有的鳞茎,移栽后成活情况良好。一些品种如Rainbow hybird和Pink perfection的试管苗移栽后一年半.即开出大而美丽的花朵。

(5)胚培养 在杂交育种工作中,为防止杂种胚与母本胚乳间不亲和,有可能造成胚败育的情况下、可采取胚培养,以克服不亲合现象,有利于育种工作顺利进行。

培养时仍以MS培养基较好,蔗糖浓度视种类而异.常在20一40克/升之间,pH值以5.0较为适宜,NAA用量只宜在0.01一0.001克/升间。加入适量BA有利幼胚成活。高BA会抑制胚根的产生,并促进胚组织愈伤组织化。通常先用MS十BA l十NAA 0.1培养促进愈伤组织生长,然后将长大的愈伤组织转移到l/2MS不加任何激素的培养基上,约3个月后,可形成大量的不定芽,延长培养时间.就会生根,产生出完整的杂交后代。

(6)百合无病毒苗培养 百合主要受花叶病毒等侵染,引起品种退化,鳞茎变小。目前,对植物病毒病的治疗尚无有效的方法,一些有希望的措施如采用化学药剂,物理射线等疗法虽然有一定的作用,但还处于实验研究阶段。因此,培育无病毒苗仍是当前防治病毒的有效方法。因为病毒在植物体上的分布是不均匀的。幼嫩的茎尖分生组织中病毒含量微少。甚至不含病毒。采用茎尖分生组织培养的方法,可以获

得无病毒植抹。

取材:在消毒的百合嫩梢上取0.2一0.3毫米的茎尖分生组织,或先进行鳞片培养(通过砂培或试管培养),待形成小球茎后,在其上剥离分生组织进行培养。

培养:接种好的百合茎尖分生组织,通常置于25—28℃的温度,光照强度初期1000一1500勒克斯、后期3000勒克斯,16/8小时的光暗周期的条件下培养。采用过的培养苗有:White、Barker、Kassanis、改良Ms以及Nielsen等。

河原林等(1977)在培养鹿子百合茎尖时,采用Ms大量元素和Nitsch微量元素与有机成分,蔗糖4%,PH值为5.7——5.8的培养基。在生长素存在下培养70天形成小球。加入1毫克/升BA,55天可以获得幼苗。

参考资料
[1].  组织培养技术在百合研究生产中的应用--培养基和培养结果   http://27net.net/tid-5282/

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  • 更新时间: 2015-12-10