茎尖组织培养产生脱毒甘薯苗的病毒检测方法

①血清学法(NCM—ELISA)鉴定。每试管苗采取2片叶，在提取缓冲液中(Tris缓冲液：0.2摩尔／升pH7.2PBk)匀质化，静置30分钟取澄清液，点样在准备好的硝酸纤维素样膜上，进行斑点酶联免疫吸附试验，然后冲洗、显色，阳性反应为蓝紫色，阴性反应为五色，若起阳性反应者则为没有脱去病毒。血清学法可大量、快速、简便地鉴定初级试管苗，但专一性强，一种抗血清仅能鉴定一种病毒。

②指示植物嫁接法鉴定。因实验条件和抗血清制备的限制，用指示植物巴西牵牛(Ipomoea setosa)嫁接鉴定是目前大多数科研单位首选的方法。该方法虽时间慢、周期长，但比血清学方法更灵敏、更直观、更可靠。具体做法：早春时巴西牵牛种子，在实验室砂盘里催芽1～2周，而夏季可直接在湿纱布上催芽3～5天，催芽后小心播种在混合沙土盆中，每盆 3株，置于防虫温网室内，让其生长，2～3周后，选具有2片展开真叶的巴西牵牛植株，用待鉴定并驯化过的甘薯试管苗的茎或叶柄作接穗，切成楔形，侧接在巴西牵牛的第一片真叶下，用塑料胶膜扎好，并用湿纱布蔽阴保护接穗，嫁接成活 2～3周后，巴西牵牛就会表现症状；若巴西牵牛新叶出现斑点、明脉、褪绿、斑驳、皱缩、偏上性矮化等症状，即说明薯苗带有病毒。