发病小龙虾白斑症病毒（WSSV）检出一例

江苏省苏州市吴中区一小龙虾、河蟹混养池塘，面积3亩，水深1.3米，无增氧机，平底塘（见图1）。2015年元旦后，用五氯酚钠杀野杂鱼，1月中旬种植伊乐藻，2月底一次性放规格55头/斤的蟹苗70斤。池塘未彻底清塘，塘中有小龙虾，数量不详。3月份开始投喂配合饲料和玉米，4月中旬开始喂冰鲜鱼。进入6月份，塘中小龙虾大量繁殖，密度增大，龙虾夹草，导致草烂，草烂之后，小龙虾开始出现死亡，一开始每天死亡几只、十几只，6月中旬，死亡量增多，每天死亡10斤左右，6月20号河蟹出现死亡，但死亡量不大，总共就几只死亡。在小龙虾出现死亡后，养殖户停止喂鱼，只投喂配合饲料和玉米。
        
2015年6月24日下午到池塘检查，塘中漂浮着少量死龙虾，测定水温26℃，pH值9.1，氨氮、亚硝酸盐测不出。用网兜从池塘边的防逃网上取4只发病的小龙虾（见图2），主要症状为病虾无力，头胸甲易剥离。分别从4尾虾的肝胰腺中接种进行细菌分离培养，并取鳃和肝胰腺用95%酒精固定，进行白斑症病毒（WSSV）、螺原体（Spiroplasma）、类立克次氏体（RLO）检测。
        
结果：经28℃培养24h，其中3只虾分离出少量细菌（见图3），分离菌经16S rDNA测序鉴定为弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii），药敏试验结果显示，分离菌对“鳃皮肠利康”、“出败康”、“肠苷康”敏感（见图4）。经PCR检测，4只小龙虾白斑症病毒（WSSV）均呈阳性，螺原体（Spiroplasma）和类立克次氏体（RLO）均呈阴性（见图5）。
        
分析：1、每年6月份是华中地区小龙虾（克氏原螯虾）发病高峰期，死亡量大，按照细菌病处理效果不明显，根据头胸甲易剥离的症状和病毒检测结果，以及相关资料报道（王忠发2007，薛晖2010）初步确诊是白斑症病毒（WSSV）感染引起的发病。
        
2、本病例中发病小龙虾体内同时分离到弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii），李华等（2001）确定该菌是河蟹的致病菌，本病例分离的该菌是否是继发感染、对小龙虾是否产生危害还有待进一步观察。（利洋研究所 雷燕 张文文 利洋吴中店 许先翔 提供 2015.08.20）