皱纹盘鲍稚鲍剥离后大量死亡的原因及对策的研究

    随着皱纹盘鲍养殖规模迅速的发展，其育苗工作普遍存在着稚鲍于剥离后15—60内天出现不同程度大量死亡的现象，死亡率高达80％以上，保苗率一般维持在3—20％之间，多数育苗场的保苗率低于10％，目前此种情况一直未能得以解决。由于鲍苗大量死亡导致生产成本增加，许多场家不能维持正常生产，部分场家停产、转产，致使供养成的苗量锐减。特别值得重视的是：存活下来的鲍苗，无论放在海上或是陆地工厂化养殖的过程中，部分5cm以内的成鲍会瘦弱死亡，其症状与稚鲍死亡症状极其相似，因此不能排除成鲍、稚鲍的死亡属一种疾病所致的可能性。如果该问题不解决，不仅会增加育苗成本，而且还会影响育成期的成活率，制约着养鲍业的发展。对于造成剥离稚鲍大量死亡的原因众说不一，有机械损伤之说，也有换口饵料不适之见。目前，面对稚鲍的大量死亡，多数场家处于诊断缺少科学依据、治疗无方法、检测无手段、预防无从下手的状况。形成这种局面的主要原因就是对病因缺乏认识，对两种绝然不同的两类流行传染病不能及时作出诊断。因此找出致病因子，研究其生物学特性，筛选防治药物对达到积极预防、有效控制、彻底治疗的目的具有重要的意义。

　　一、材料

　　1.供试皱纹盘鲍稚鲍以下简称稚鲍由山东省荣成市海珍品育苗场提供。

　　2.抗病毒药物由武汉大学提供；抗菌素、中药材在荣成市药材公司购买。西药按自测的有效剂量计算；中药配伍粉碎后，每10ｇ加海水500ml煎至400ml后浸饵喂食。

　　3.五日龄鸡胚购自当地养鸡场。

　　二、方法

　　1.病症、病程的观察

　　1）1996、1997两年逐日对病毒性疾病病症、病程的发生与发展进行观察及统计、记录稚鲍日死亡数，用粒或毫升数表示。

　　2）1998、1999两年逐日对非病毒性疾病的病症、病程的发生与发展进行观察及统计、记录稚鲍日死亡数，计量方法同上。

　　3）观察组设平行对照，给鲍苗喂食1／2剂量的药物延长病程，以便于观察流行病的发生、发展过程。

　　2.防治药物的筛选和有效剂量的测定

　　1）依据病原体分离鉴定的结果，把药物筛选圈定在抗病毒（含病毒）、大环内酯和四环素类、中药四大类六种药物内进行。

　　2）有效剂量的计算与测定：按人的用量＋Var计算出基准用量（Var由药物的扩散速度、海水相关金属离子浓度、药物实际有效含量、摄食量四个因子确定）。有效剂量在基准用量×1／2、基准用量、基准含量×2三个浓度范围内进行测定。用死亡数变化、摄食量、生长速度和聚板等指标评估药效和副作用。

　　3）同时防治两种疾病的药物配制和应用实验：按测定的有效剂量称取两种药物加入抗氧剂等添加剂混匀、压片，数片或称取投喂，方法、疗程同4）。

　　4）根据药物的性质，按Bid或Tid摄喂。Bid在上午和下午进行；Tid在上午、下午、夜间进行。7天为一疗程，管理与常规同。

　　3.电镜观察、组织病理

　　取两种流行病罹病稚鲍，经戊二醛、锇酸双重固定，Epon812包埋制切片，超薄切片用铅、铀盐染色，在JEM100cx电镜下观察、拍照；同期取两种患病稚鲍按常规制备组织切片，观察病原体侵染的组织。

　　三、结果(流行病学调查、病原体的分离鉴定、超微结构和组织病理另文报告，本文只引用相关结果)

　　1.病症

　　病毒性疾病：这种疾病的病原体是一种在细胞质内复制的病毒，主要侵染神经细胞和血液循环系统。被感染的稚鲍较易察觉的早期症状是腹足开始逐渐肿大，行动迟缓，爬行时出现“拖尾现象”。随着病程的发展，腹足继续肿大，侧视可见稚鲍附着态呈隆起状，壳与附着板间距增大，腹足出现明显的神经症状，病苗运动困难或不能爬行，施以干扰，病苗即呈欲行而腹足不听使唤的姿态，用手平行轻推，则会发现病苗附着不牢；稚鲍的排泄功能减退，粪便不能排射到正常位置，降落到壳体及出水孔；病苗体液分泌异常，体表附有一层粘液，ＳＥＭ和解剖镜检查鲍体含壳粘附有饵料、微藻及粪便，同期病苗停止生长，壳边缘出现刻纹、褪色。随病情继续恶化，到了晚期病苗基本上丧失附着力，较易脱落，脱落苗一般腹足朝上，可清楚观察到死鲍腹足肿大、僵直；脱落频死苗腹足也肿大，其腹足活动较眼和触角迟钝，不能自行翻身附着，助其翻身，仍不能重新附着。罹病稚鲍群体则早期表现为苗无规律的分散，散苗日益增多不聚堆(以下简称散板)，病程中期伴有摄食量减少。到发病高期，无附着力的稚鲍增多，稍有外界干扰病苗即脱落，严重时投饵后可见波纹板沟底有许多腹足朝上的脱落苗。此流行病若发生在稚鲍避光期，可观察到夜间上板摄食的苗量减少，剩饵逐日增多的现象，白天滞留在板上的苗也随着病情的加重而增多，病轻的苗在板上聚堆，病重苗则表现为无规律的散板。感染试验初步测定潜伏期约5—7天，病程12—15天，见稚鲍死亡曲线图一对照组。用抗菌素、磺胺类药治疗均无效。

　　非病毒性流行病；该流行病由立克次氏体所引发的。患病早期稚鲍群体的摄食量、附着力无明显的变化，较易察觉的症状是稚鲍群出现明显的区域性散板，同时白天爬网箱的苗量日渐增多，多为个体小的苗，虽用工具刷回波纹板，不久又会重新爬上来，这是与病毒性疾病早期症状不同之处。随着病程的发展，区域散板愈来愈明显，散板面积越来越大。此时才显现摄食量减少，食欲由减退逐步发展到厌食、避食，投饵后病苗爬至波纹板的高处俗称沟顶，通水后病轻苗陆续爬回沟底。此时若能及时治疗，经三天喂药后，病苗则可治愈恢复正常；该时期若得不到治疗，病情则继续恶化，爬上沟顶的苗便不再返回沟底，常见病鲍抬头侧身，停止摄食，渐渐消瘦而死亡。病鲍及死亡稚鲍壳色灰暗，无鲜艳感，软体消瘦、萎缩，呈壳大肉小状。随着该病的传播面的增大，池底的苗也会被感染，池底罹病苗也爬至池壁接近水面处。病理检查，肠道组织受损，消化腺肿大。]

　　2.疾病防治

　　病毒性疾病的防治：1996年进行药物筛选，有效剂量测定结果表明，基准剂量和基准剂量×1／2在防治效果上无明显差别。施用2倍剂量的药物在一定时间内对稚鲍的食欲有些影响，但停药后即可恢复正常。1997年对病毒性流行病防治进行应用试验。给刚剥离的稚鲍喂食两个疗程的抗病毒药物两疗程间停药3天、中药作为预防组；同期汇集相同数量的病苗做为治疗组；设同期剥离不喂食药物稚鲍作为对照组。防治应用试验结果：对照组于第11天显病，稚鲍死亡数逐日增加，18—20天进入死亡高峰期，到30天残废率达84％；喂食抗病毒药物的预防组，鲍苗始终处于稳定状态，筛选结果预防保苗率73％；喂食抗病毒药物治疗组的苗于第5天开始聚板，死亡数呈下降趋势，到第8天，苗情基本上好转，第二疗程结束时，苗情恢复正常，筛选结果保苗率55％；中药组也未发生流行病，但剥离后15天内死亡数多于西药组，20天后死亡正常。预防组、治疗组及对照组的保苗率见表1；各试验组稚鲍死亡曲线见图一。

　　此时正值车间该病发生的高峰期，采用上述治疗方案对全场200池（含4池对照）苗进行治疗，苗也于用药的第三天出现聚板趋势，摄食量增加，残废数下降，经两个疗程的治疗后，185个池的苗恢复正常，开始生长。其中有11个池的苗死亡数下降到一定水平时就不再降低，经喂食抗非病毒性疾病药物后，死亡数才恢复到正常水平。车间发病及治疗过程中稚鲍死亡变化见图二。

　　非病毒性疾病：1998、1999两年观察到的病症相同，属同一种非病毒性流行病（见图三）。药物筛选结果表明该流行病对四环素类中的几种抗菌素敏感，用磺胺类抗病毒药物治疗无效，磺胺类药物施用的时机不当，反而加重病情。1998年由于对该病认识不足，出现误诊，错将非病毒性疾病按病毒性疾病治疗，未达到应有的效果。1999年在确诊稚鲍发病类型，于剥离后立即投喂2个疗程的对症抗菌素，实验组稚鲍没有发生流行病，保苗率达71％；对照组发生大的流行病保苗率仅为9％。基准剂量和基准剂量×2都能达到预防效果，防治效果见表1。

　　在以上两种疾病的防治过程中，也曾出现过当使用一种对症药物防治后，多数池的苗能恢复正常，但也有小部分池的苗死亡率降低到一定程度就不再继续下降，而需喂食另一类药物死亡率才会恢复到正常水平的情形。

　　两种流行病的综合防治：把两种药物按有效剂量混合在一起，加入抗氧化剂等添加剂，喂食2mm稚鲍18000头，7天为一疗程，连喂2疗程中间停2天，10天后再喂第3疗程，以后每月喂一疗程；另设平行对照组，平行对照组只喂一种对症药物。跟踪观察5个月，两种流行病在稚鲍群中都没有发生。剥离后第43天进行筛选，保苗率达76％，筛选结果见表一，死亡曲线见图四。从表一、图四可以看出平行对照组稚鲍死亡率高于综合防治组，剥离规格综合防治组好于平行对照组。

　　四、讨论

　　1.病原体的分离鉴定、生物学测定、病症观察、药物实验及电镜、组织病理结果表明目前在稚鲍群体中主要存在着病毒和立克次体两种主要流行性传染病，流行病学调查结果和药物实验说明这两种疾病的流行在同一养殖场内有时单独发生，有时同时发生，即使在同一地区几个相邻的育苗场每年发生的流行病也不尽相同。

　　2.流行病并非在稚鲍剥离后才发生的，有时在采苗板上已发生流行，在采苗板饲育期间苗的单位密度小，一般疾病的传染速度较慢，流行病学调查也发现剥离前稚鲍已死亡60％以上的事例。剥离后由于苗的密度相对增大，再加上稚鲍有群居习性，加快了病原体的传递速度和机率，形成急性发生期，造成稚鲍短期内大量死亡。鲍还存在其他疾病和天敌，但还没有发现其他对鲍的损害超过这两种流行病的报导。

　　3.这两种疾病在临床症状和罹病体征有许多不同之处，虽然某些临床症状有相同或相似的地方，但这些相似的症状在病程中显现的时期不相同，所以通过对病症的仔细观察，还是能把两种流行病加以区别开来，对流行病种类作出正确的诊断。

　　4.防治试验结果表明通过对症用药可以抑制这两种疾病的蔓延流行，从提高保苗率的角度上看，预防效果比治疗效果好，试验结果也显示综合防治的效果最好。目前通过皱纹盘鲍与日本鲍或九孔鲍杂<