育肥猪的疫病诊断技术三

5、免疫学诊断

免疫学诊断是传染病诊断和检疫中常用的重要方法，包括血清学试验和变态反应两类。

1.血清学试验：利用抗原和抗体特异性结合的免疫学反应进行诊断。可以用已知抗原来测定被检动物血清中的特异性抗体，也可以用已知的抗体（免疫血清）来测定被检材料中的抗原。血清学试验有中和试验、凝集试验（直接凝集试验、间接凝集试验、间接血凝试验、SPA协同凝集试验和血细胞凝集抑制试验）、沉淀试验（环状沉淀试验、琼脂扩散沉淀试验和免疫电泳等）、溶细胞试验（溶菌试验、溶血试验）、补体结合试验以及免疫荧光试验、免疫酶技术、放射免疫测定、单克隆抗体和核酸探针等。近年来由于与现代科学技术相结合，血清学试验在方法上日新月异，发展很快，其应用也越来越广，已成为传染病快速诊断的重要工具。

2.变态反应：猪患某些慢性传染病时，可对该病病原体或其产物的再次进入产生强烈反应。能引起变态反应的物质（病原体、病原体产物或抽提物）称为变态原，如结核菌素，将其注入患病动物时，可引起局部或全身反应。



6、分子生物学诊断



分子生物学诊断又称基因诊断。主要是针对不同病原微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。自1976年以来，基因诊断方法取得巨大进展。建立了DNA限制性内切酶图谱分析，核酸电泳图谱分析。寡核苷酸指纹图、核酸探针、聚合酶链反应（PCR）、Western杂交以及新近几年发展起来的DNA芯片技术等。在传染病诊断方面，具有代表性的技术主要有三大类：核酸探针、PCR技术和DNA芯片技术。



1.PCR技术：又称为体外基因扩增技术。PCR技术主要是检测病原，用于传染病的早期诊断和传染源的鉴定。传染病的病原体主要有真核生物、原核生物和非细胞型生物（病毒、朊病毒等）三大类。每类病原体都有其特异性的核酸。检测出特异性核酸就能确定致病的微生物，就能确诊是哪种传染病。



2.核酸探针技术：核酸探针又称为基因探针、核酸分子杂交技术。该方法有三大组成部分：⑴待检核酸（模板）；⑵固相载体（NC硝酸纤维膜或尼龙膜）；⑶用同位素、酶、荧光标记的核酸探针。探针诊断应用范围：⑴可对病毒、细菌、支原体、立克次氏体、寄生虫、原虫等致病原都能做出快速准确诊断。⑵在混有大量杂菌或混合感染物中直接检出主要致病原。包括难以在体外培养的病原。⑶检出带菌、带毒隐性感染的动物。⑷可对病原微生物进行准确分类鉴定。⑸可对动物产品或食品进行卫生检验。



3.DNA芯片技术：科研人员正在研究该项技术在动物传染病的诊断上的应用。DNA芯片技术是在核酸杂交、测序的基础上发展起来的，与Southern杂交、Northern杂交同出一个原理，即DNA碱基配对和序列互补原理。目前已有筛选检测HIV病毒蛋白酶基因和反转录酶基因突变的DNA芯片商品。金黄色葡萄球菌、白色念球菌DNA芯片也已问世。
育肥猪的疫病诊断技术三
2008-10-21【信息提供机构】彩田农业科技信息中心【来源】无公害育肥猪标准化生产

　　
5、免疫学诊断



免疫学诊断是传染病诊断和检疫中常用的重要方法，包括血清学试验和变态反应两类。



1.血清学试验：利用抗原和抗体特异性结合的免疫学反应进行诊断。可以用已知抗原来测定被检动物血清中的特异性抗体，也可以用已知的抗体（免疫血清）来测定被检材料中的抗原。血清学试验有中和试验、凝集试验（直接凝集试验、间接凝集试验、间接血凝试验、SPA协同凝集试验和血细胞凝集抑制试验）、沉淀试验（环状沉淀试验、琼脂扩散沉淀试验和免疫电泳等）、溶细胞试验（溶菌试验、溶血试验）、补体结合试验以及免疫荧光试验、免疫酶技术、放射免疫测定、单克隆抗体和核酸探针等。近年来由于与现代科学技术相结合，血清学试验在方法上日新月异，发展很快，其应用也越来越广，已成为传染病快速诊断的重要工具。



2.变态反应：猪患某些慢性传染病时，可对该病病原体或其产物的再次进入产生强烈反应。能引起变态反应的物质（病原体、病原体产物或抽提物）称为变态原，如结核菌素，将其注入患病动物时，可引起局部或全身反应。



6、分子生物学诊断



分子生物学诊断又称基因诊断。主要是针对不同病原微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。自1976年以来，基因诊断方法取得巨大进展。建立了DNA限制性内切酶图谱分析，核酸电泳图谱分析。寡核苷酸指纹图、核酸探针、聚合酶链反应（PCR）、Western杂交以及新近几年发展起来的DNA芯片技术等。在传染病诊断方面，具有代表性的技术主要有三大类：核酸探针、PCR技术和DNA芯片技术。



1.PCR技术：又称为体外基因扩增技术。PCR技术主要是检测病原，用于传染病的早期诊断和传染源的鉴定。传染病的病原体主要有真核生物、原核生物和非细胞型生物（病毒、朊病毒等）三大类。每类病原体都有其特异性的核酸。检测出特异性核酸就能确定致病的微生物，就能确诊是哪种传染病。

2.核酸探针技术：核酸探针又称为基因探针、核酸分子杂交技术。该方法有三大组成部分：⑴待检核酸（模板）；⑵固相载体（NC硝酸纤维膜或尼龙膜）；⑶用同位素、酶、荧光标记的核酸探针。探针诊断应用范围：⑴可对病毒、细菌、支原体、立克次氏体、寄生虫、原虫等致病原都能做出快速准确诊断。⑵在混有大量杂菌或混合感染物中直接检出主要致病原。包括难以在体外培养的病原。⑶检出带菌、带毒隐性感染的动物。⑷可对病原微生物进行准确分类鉴定。⑸可对动物产品或食品进行卫生检验。

3.DNA芯片技术：科研人员正在研究该项技术在动物传染病的诊断上的应用。DNA芯片技术是在核酸杂交、测序的基础上发展起来的，与Southern杂交、Northern杂交同出一个原理，即DNA碱基配对和序列互补原理。目前已有筛选检测HIV病毒蛋白酶基因和反转录酶基因突变的DNA芯片商品。金黄色葡萄球菌、白色念球菌DNA芯片也已问世。