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基因组文库

标签: 基因工程:基因组文库

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      基因组文库(Genomic Library)是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA 片段克隆到某种载体上而形成的集合。基因组文库根据DNA 来源又分为核基因组文库、叶绿体基因组文库及线粒体基因组文库。基因组文库构建时遗传信息供体是基因组DNA,因而无发育时期及组织器官特异性,在一个完全的基因组文库中包含着基因组DNA 上的所有编码区及非编码区序列的克隆; 生物有机体的每一个基因在文库中都有其克隆,该克隆的基因片段里包括着间隔序列,所以基因组文库可真实地显示基因组的全部结构信息。

      但是如果细胞或者细菌死亡了,这些DNA片段与细胞、细菌内的染色体进行了重组,加上了复制原件之类的必备“元器件”,变成细胞、细菌的组成成分,可以随着细胞或细菌的分裂繁殖,不断地复制。因此基因组文库不是静态的,而是动态的储存。这些被改装过的DNA片段,在分子生物学上称为重组DNA。原来,基因组文库就是简化的“转基因”。

      做基因组文库为的是下一步的分子杂交(molecular hybridization)。

      基因组文库就好比一堆锁眼被堵住的形形色色的锁头,每把锁头就是一个目的基因。分子杂交,就是把堵住锁眼的物体拿掉,拿着钥匙逐个去试锁,直到找到匹配的那把锁。这里的“钥匙”,是指根据目标基因的部分序列信息,合成的一小段DNA单链序列;“锁头”指的是目的基因。

      分子杂交是把基因组文库汇总的双链DNA解开,变成单链,然后加入短序列的DNA(钥匙),找到彼此匹配的较长的DNA片段(锁头)。找到若干“锁头”后,根据这些DNA序列中重叠的区域,按顺序重新排列DNA片段,再用DNA剪切酶和链接酶剪切和粘贴,一个完整的目的基因序列就得到了。

      构建基因组文库,再用分子杂交等技术获取基因克隆,当生物基因组比较小时,此法较易成功;当生物基因组很大时,构建完整的基因组文库本身就非易事,而要从庞大的文库中去获取目的基因,工作将更加浩繁。

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  • 更新时间: 2019-08-09